CellLight蛍光タンパク質を使用すると、生細胞中の特定の構造を容易に標識化できます。すぐに使用できるコンストラクトを細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。これらのコンストラクトは、特定の細胞内構造をターゲットとする蛍光融合タンパク質を発現します。蛍光タンパク質は、BacMam技術を用いた簡単なトランスフェクションステップにより導入され、分子生物学的技術を必要としないため、細胞染色液のように機能します。
CellLight蛍光タンパク質による標識化の利点
- 実験ニーズを満たすのに理想的な特異性の高い細胞内ターゲット
- どの細胞構造にも、添加-インキュベーション-イメージングという簡単なプロトコルを使用可能
- 他のCellLightタンパク質、抗体、または有機色素を用いたマルチプレックス解析が可能
CellLight蛍光タンパク質選択ガイド
GFP | RFP | CFP | |
---|---|---|---|
励起波長領域 | 488-510 | 555-584 | 435-485 |
サイズ | 1 mL | 1 mL | 1 mL |
アクチン | C10582 | C10583 | — |
細胞質 | B10383 | — | — |
小胞体 | C10590 | C10591 | — |
初期エンドソーム | C10586 | C10587 | — |
後期エンドソーム | C10588 | C10589 | — |
ゴルジ | C10592 | C10593 | — |
ヒストン(ヒストン2B) | C10594 | C10595 | — |
リソソーム | C10596 | C10597 | — |
ミトコンドリア | C10600 | C10601 | — |
核 | C10602 | C10603 | — |
ペルオキシソーム | C10604 | — | — |
細胞膜 | C10607 | C10608 | C10606 |
タリン | C10611 | — | — |
チューブリン | C10613 | C10614 | — |
BacMam 2.0形質導入コントロール | B10383 | — | — |
コンジュゲートなし | |||
Null virus (control) | C10615 |
※日本国内において上記CellLight製品はいずれも、カルタヘナ法該当製品として販売しております。
CellLightワークフロー
BacMam 2.0ベースのCellLight蛍光融合タンパク質を使用して遺伝子を発現するのは、簡単かつ効率的です。
- 完全培地の細胞にウイルスを添加します。
- 一晩インキュベートします。
- 画像化や、将来の使用用に冷凍します。
プレートに細胞を入れる直前にCellLight蛍光融合タンパク質と混合することで、形質を導入できます。あるいは、すでにディッシュまたはプレート上にある細胞にウイルスを添加することで接着細胞に形質を導入することもできます。一般的に、70%コンフルエンスでBacMam粒子と細胞の比率を20:1にすると、形質導入が一番うまくいきます。
BacMam技術を用いると、アッセイに応じた細胞モデルを作成し実行するために、効率的な形質導入システムを構築できます。BacMam技術により、ターゲット蛍光タンパク質で小器官を標識化したり、イオンチャネルや受容体などの薬剤ターゲットを発現したり、蛍光タンパク質インジケーターで細胞プロセスをモニタリングしたりできます。Invitrogen ViraPower BacMam発現システムを使用して、ユーザー独自のカスタム構造体を作成することもできます。
- BacMam技術により研究を加速する方法の詳細をご確認ください。
CellLight蛍光融合タンパク質の使用に関するガイドライン
CellLight蛍光融合タンパク質の使用を推奨:
- 毒性や化学的破壊を最小限に抑えながら、生細胞中の小器官または細胞内構造をターゲットとする場合
- より高い解像度を必要とする機能を識別する場合
- 個々の細胞の挙動をトラッキングするため、他のCellLight蛍光タンパク質や有機色素を用いたマルチプレックス解析で、生細胞や固定細胞を解析する場合
- 膜の電位に関係なくミトコンドリアを標識化する場合や、pHに関係なくリソソームを標識化する場合
CellLight蛍光融合タンパク質の使用を非推奨:
- 細胞集団研究または自動イメージング/カウントを行う場合。CellLight蛍光融合タンパク質が100%のトランスフェクション率をもたらすことはめったにないため。(トランスフェクション率と条件は細胞タイプによって異なることがあり、使用に関する膨大な参照リストを支給)
CellLight画像ギャラリー
CellLight試薬のビデオ
ニューロン成長円錐ダイナミクスのリアルタイムの可視化
U2OS細胞分裂のタイムラプス動画
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