TaqMan® Assays の特異性と感度がタンパク質研究で実現
革新的な TaqMan® Protein Assays は、感度と特異性の高い抗体のタンパク質結合と 5' リアルタイム PCR の優れた定量性を組み合わせました。 これによって、少量のサンプルや限られた数の細胞に含まれるタンパク質をすべて同一のアッセイ フォーマットで迅速で簡単に同定し、比較定量できます。 また TaqMan® Protein Assays Open キットでは、目的のタンパク質に合わせたビオチン化抗体を使用してお客様独自の TaqMan® Protein Assay を作成できます。
- さらに、同じリアルタイム PCR プラットフォームで mRNA/miRNA の発現を直接タンパク質発現に関連付けることができます。
- ウェスタン ブロットや免疫染色法よりも高い感度と定量性能を発揮し、細胞の固定化や染色も不要です。
- TaqMan® Protein Assays Open キットは、目的のタンパク質に合わせたビオチン化抗体を使用してシンプルなアッセイを開発できます。単一のポリクローナル抗体を使用することもできます。
TaqMan® Chemistry–Based Protein Assays を初めてお使いいただくお客様へ では、ここから始めましょう！
目的の分野を選択:
RNA とタンパク質のデータの関連性
mRNA/microRNA（miRNA）アッセイの結果のバリデーションに有効
siRNA 誘導サイレンシングのバリデーション
siRNA によるターゲット遺伝子のノックダウンを確認
実験のワークフロー: 各ステップに必要な製品
アッセイは、2 つのプールに分割された抗原精製済みポリクローナル抗体溶液、または ELISA に適した抗体ペア（通常はポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の組み合わせ）から作成します。 | お勧めの製品 |
細胞溶解液の濃度が 1,000 cells/µL となるよう細胞を溶解します。 | お勧めの製品 |
アッセイ プローブは、ビオチン-ストレプトアビジン結合を利用してオリゴヌクレオチドを標識したターゲット特異的抗体です。 プローブ ペアの各オリゴヌクレオチドは、5' または 3' 末端を提示します。これらの末端は、アッセイ プローブ ペアの各抗体がターゲット タンパク質の 2 つの異なるエピトープに結合すると接近します。 | お勧めの製品 |
リガーゼの基質は、第 3 のオリゴヌクレオチドをアッセイ プローブ ペアのオリゴヌクレオチド末端にハイブリダイゼーションすることで橋かけ構造を形成します。 この構造は、アッセイ プローブがお互いに近接している場合に形成されやすくなります。 その後のプロテアーゼ処理によってリガーゼは不活化されます。 | お勧めの製品 |
ライゲーション産物は、TaqMan® Assay を使用したリアルタイム PCR のテンプレートとなり、タンパク質の検出と定量に使用されます。 | お勧めの製品 |
装置のデータ ファイルの Ct 値をデータ解析ソフトウェアにインポートし、倍率変化の結果から比較定量します。 | お勧めの製品 |
アッセイは、2 つのプールに分割された抗原精製済みポリクローナル抗体溶液、または ELISA に適した抗体ペア（通常はポリクローナル抗体とモノクローナル抗体の組み合わせ）から作成します。 | お勧めの製品 |
細胞溶解液の濃度が 1,000 cells/µL となるよう細胞を溶解します。 | お勧めの製品 |
アッセイ プローブは、ビオチン-ストレプトアビジン結合を利用してオリゴヌクレオチドを標識したターゲット特異的抗体です。 プローブ ペアの各オリゴヌクレオチドは、5' または 3' 末端を提示します。これらの末端は、アッセイ プローブ ペアの各抗体がターゲット タンパク質の 2 つの異なるエピトープに結合すると接近します。 | お勧めの製品 |
リガーゼの基質は、第 3 のオリゴヌクレオチドをアッセイ プローブ ペアのオリゴヌクレオチド末端にハイブリダイゼーションすることで橋かけ構造を形成します。 この構造は、アッセイ プローブがお互いに近接している場合に形成されやすくなります。 その後のプロテアーゼ処理によってリガーゼは不活化されます。 | お勧めの製品 |
ライゲーション産物は、TaqMan® Assay を使用したリアルタイム PCR のテンプレートとなり、タンパク質の検出と定量に使用されます。 | お勧めの製品 |
装置のデータ ファイルの Ct 値をデータ解析ソフトウェアにインポートし、倍率変化の結果から比較定量します。 | お勧めの製品 |