ピューロマイシンは、bacterium Streptomyces albonigerにより生成された、アミノヌクレオシド系抗生物質です。これは、リボソームへのペプチド転写を破壊してタンパク質合成を阻害し、翻訳時に早期の連鎖停止を引き起こします。これは原核細胞および真核細胞の両方における強力な翻訳の阻害物質です。ピューロマイシンに対する耐性は、Streptomyces由来のpuromycin N-acetyl-transferase遺伝子(pac)によって与えられます。ピューロマイシンは作用が早く、抗生物質濃度が低い場合、急速な細胞死を引き起こします。付着哺乳類細胞は2 ~5 µg/mlの濃度に敏感ですが、懸濁液中の細胞は0.5 ~2 µg/mlの低濃度に敏感です。ピューロマイシン耐性の安定した哺乳類細胞株は、一週間以内に作ることができます。
表 1 - 推奨ピューロマイシン濃度
細胞株 | 濃度 [µg/ml] | 参考文献 |
---|---|---|
HT1080 (ヒト 線維肉腫) | 0.2–0.4 1 2 | J Biol Chem282:29314–29322 (2007) J Virol82:3320–3328 (2008) Cancer Res68: 1417–1426 (2008) |
HeLa (ヒト子宮頸癌) | 1-2 2 2 | Genes Cells12:397–406 (2007) Mol Cell Biol28:4104–4115 (2008) PNAS105:16490–16495 (2008) |
HEK293 (ヒト胚腎臓) | 0.25 2 3 | Nucleic Acids Res36:e83 (2008) Mol Cell Biol28:4104–4115 (2008) Mol Cell Biol 27:4708–4719 (2007) |
Hep G2 (ヒト肝細胞癌) | 0.3 2 2 | J Biol Chem283:21462–21468 (2008) Mol Cell Biol28:4104–4115 (2008) J Biol Chem283:708–715 (2008) |
ヒト胚性幹(ES)細胞 | 0.5 1 5 | Nucleic Acids Res 36:e148 (2008) Stem Cells26:850–863 (2008) Stem Cells26:2245–2256 (2008) |
MCF-7 (ヒト乳がん) | 0.45 1 2 | RNA13:1375-1383 (2007) Cancer Res68:1319–1328 (2008) Mol Cell Biol28:4104–4115 (2008) |
H1299 (非小細胞肺癌) | 1 1.5 2.5 | Nucleic Acids Res 35:e17 (2007) J Biol Chem283:33394–33405 (2008) Proc Natl Acad Sci USA 105:1937–1942 (2008) |
MDA-MB-231 (ヒト乳がん) | 0.5 1.5 5 | Mol Cell Biol28:997–1006 (2008) Mol Cell Biol 27:324 – 339 (2007) Mol Cell Biol 28:687–704 (2008) |
A549 (肺がん) | 1.5 1.5 | Mol Cell Biol 27:324–339 (2007) J Biol Chem283:33394–33405 (2008) |