ヌクレアーゼフリー水は、脱イオン、ろ過、オートクレーブされ、エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、RNaseなどの汚染物質について試験された水です。この水は、DNaseとRNaseを含むヌクレアーゼフリーであることが保証されていることを厳格に試験されています。
核酸の分離と解析に使用する試薬に含まれるヌクレアーゼ汚染は、実験の不整合の原因となり、場合によっては実験の失敗につながります。汚染源を特定しようとする際に、試薬を調製する際に使用した水や沈殿したRNAを再懸濁する際に使用した水を見落としがちです。
精製水でも高いpHとミネラルを持つ場合があり、特定の塩やpH条件を必要とする反応を妨げる可能性があります。当社では、ジエチルピロカーボネート（DEPC）処理水、ヌクレアーゼフリー水（DEPC未処理）、RT-PCRグレードの水、超純水をいくつかのブランドおよびグレードで提供しています。このヌクレアーゼフリーの水は、非特異的エンドヌクレアーゼ、エキソヌクレアーゼ、およびRNase活性のコンタミネーションについて厳密にテストされています。
ヌクレアーゼフリー水と蒸留水の違いは何ですか？
ヌクレアーゼフリー水と蒸留水の違いは、ヌクレアーゼフリー水は特別に処理され、ヌクレアーゼを含まないことが試験されています。蒸留水とヌクレアーゼフリー水はどちらも高純度水ですが、ヌクレアーゼフリー水は分解から核酸を保護する必要があるアプリケーションに適しています。
ジエチルピロカーボネート処理水
ジエチルピロカーボネート（DEPC）処理水には、RNaseの阻害に使用される化学物質が含まれています。DEPC処理済みのヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseフリーおよびDNaseフリーの水を試験しました
- DEPCを不活性化するためのオートクレーブ済みの包装前後に
メンブレンフィルターでろ過し、DEPC不活性化のためオートクレーブ処理します
ダウンストリームアプリケーションによっては、オートクレーブだけでかなりの量のRNase酵素を不活性化するのに十分な場合があります。ただし、ダウンストリームアッセイの感度が高い場合は、DEPC処理ヌクレアーゼフリー水の方が適しています。脱イオン水に添加してオートクレーブし、化学的DEPCを不活性化します。
DEPC処理水はPCRに推奨されないのはなぜですか？
ジエチルピロカーボネート化学物質は、DNAポリメラーゼ活性を阻害することでPCR反応を阻害する可能性があるため、DEPC処理水はPCRには推奨されません。
DEPC処理水はRNaseの不活性化に効果的で、RNA関連の実験に有用ですが、PCR酵素を阻害して反応を損なう可能性がある残留DEPCとその副産物が存在する可能性があるため、PCRには推奨されません。代わりに、最適な性能と信頼性を確保するために、PCRにヌクレアーゼフリーまたはPCRグレードの水を使用する必要があります。
ヌクレアーゼフリー水（DEPC未処理）
当社の非DEPC処理ヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- DEPC処理されていません：残留DEPCに急性の影響を受けやすいアプリケーション（例えば、卵母細胞の注入）に最適です
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseフリーおよびDNaseフリーの水を試験しました
メンブレンフィルターでろ過されたオートクレーブ水
DEPC処理されていないヌクレアーゼフリー水はオートクレーブされており、RNaseおよびDNaseの除去専用です。DEPCの存在が無関係な場合、DEPC処理水は優れた選択肢です。ただし、卵母細胞注入やTrisバッファーを含む実験などの一部の下流アプリケーションでは、DEPC処理は推奨されません。TRISにはDEPCを不活性化するアミノ基が含まれているため、RNaseを不活性化できません。
PCR用のヌクレアーゼフリー水
PCR用のヌクレアーゼフリー水は、ヌクレアーゼフリー（RNaseおよびDNase）であることが保証されており、偽のRT-PCRシグナルにつながる可能性のあるゲノムDNAなどの核酸汚染がないことが必要です。
当社のPCR用ヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- RT-PCRグレードの水：あらゆるPCRまたはRT-PCRアプリケーションでの使用に最適です
- 各ロットはヌクレアーゼ汚染について試験済みです
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseおよびDNaseフリー、ゲノムDNAフリー
ヌクレアーゼフリーの水がPCRで使用されるのはなぜですか？
ヌクレアーゼフリー水は、核酸の分解を防ぎ、非特異的増幅を回避するためにPCRで使用します。
PCR反応には少量のDNAが含まれるため、微量のヌクレアーゼでもサンプルの完全性に大きな影響を与える可能性があります。ヌクレアーゼフリーの水を使用すると、PCRプロセス全体を通してDNAの完全性を維持するのに役立ちます。
DNaseフリーおよびRNaseフリーの水
DNaseフリーおよびRNaseフリーの水は超純水とも呼ばれます。UltraPure蒸留水は品質試験済みで、DNase、RNase、およびプロテアーゼ活性は検出されません。
当社の超純水には以下の特長があります。
- 試験済みのRNaseフリーおよびDNaseフリーの水、プロテアーゼフリーです
- オートクレーブ済み、0.1 μmのメンブレンフィルターでろ過済み
- すべての分子アプリケーションで使用できるように設計されています
ジエチルピロカーボネート処理水
ジエチルピロカーボネート（DEPC）処理水には、RNaseの阻害に使用される化学物質が含まれています。DEPC処理済みのヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseフリーおよびDNaseフリーの水を試験しました
- DEPCを不活性化するためのオートクレーブ済みの包装前後に
メンブレンフィルターでろ過し、DEPC不活性化のためオートクレーブ処理します
ダウンストリームアプリケーションによっては、オートクレーブだけでかなりの量のRNase酵素を不活性化するのに十分な場合があります。ただし、ダウンストリームアッセイの感度が高い場合は、DEPC処理ヌクレアーゼフリー水の方が適しています。脱イオン水に添加してオートクレーブし、化学的DEPCを不活性化します。
DEPC処理水はPCRに推奨されないのはなぜですか？
ジエチルピロカーボネート化学物質は、DNAポリメラーゼ活性を阻害することでPCR反応を阻害する可能性があるため、DEPC処理水はPCRには推奨されません。
DEPC処理水はRNaseの不活性化に効果的で、RNA関連の実験に有用ですが、PCR酵素を阻害して反応を損なう可能性がある残留DEPCとその副産物が存在する可能性があるため、PCRには推奨されません。代わりに、最適な性能と信頼性を確保するために、PCRにヌクレアーゼフリーまたはPCRグレードの水を使用する必要があります。
ヌクレアーゼフリー水（DEPC未処理）
当社の非DEPC処理ヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- DEPC処理されていません：残留DEPCに急性の影響を受けやすいアプリケーション（例えば、卵母細胞の注入）に最適です
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseフリーおよびDNaseフリーの水を試験しました
メンブレンフィルターでろ過されたオートクレーブ水
DEPC処理されていないヌクレアーゼフリー水はオートクレーブされており、RNaseおよびDNaseの除去専用です。DEPCの存在が無関係な場合、DEPC処理水は優れた選択肢です。ただし、卵母細胞注入やTrisバッファーを含む実験などの一部の下流アプリケーションでは、DEPC処理は推奨されません。TRISにはDEPCを不活性化するアミノ基が含まれているため、RNaseを不活性化できません。
PCR用のヌクレアーゼフリー水
PCR用のヌクレアーゼフリー水は、ヌクレアーゼフリー（RNaseおよびDNase）であることが保証されており、偽のRT-PCRシグナルにつながる可能性のあるゲノムDNAなどの核酸汚染がないことが必要です。
当社のPCR用ヌクレアーゼフリー水には、以下の特長があります。
- RT-PCRグレードの水：あらゆるPCRまたはRT-PCRアプリケーションでの使用に最適です
- 各ロットはヌクレアーゼ汚染について試験済みです
- オートクレーブ済み、メンブレンフィルターでろ過済み
- RNaseおよびDNaseフリー、ゲノムDNAフリー
ヌクレアーゼフリーの水がPCRで使用されるのはなぜですか？
ヌクレアーゼフリー水は、核酸の分解を防ぎ、非特異的増幅を回避するためにPCRで使用します。
PCR反応には少量のDNAが含まれるため、微量のヌクレアーゼでもサンプルの完全性に大きな影響を与える可能性があります。ヌクレアーゼフリーの水を使用すると、PCRプロセス全体を通してDNAの完全性を維持するのに役立ちます。
DNaseフリーおよびRNaseフリーの水
DNaseフリーおよびRNaseフリーの水は超純水とも呼ばれます。UltraPure蒸留水は品質試験済みで、DNase、RNase、およびプロテアーゼ活性は検出されません。
当社の超純水には以下の特長があります。
- 試験済みのRNaseフリーおよびDNaseフリーの水、プロテアーゼフリーです
- オートクレーブ済み、0.1 μmのメンブレンフィルターでろ過済み
- すべての分子アプリケーションで使用できるように設計されています
RNAを扱う際の特別な課題を満たすため、サーモフィッシャーの水はヌクレアーゼフリーであることが保証されています。タイプII18メガオームでろ過され（最先端の逆浸透ろ過および脱イオン化により）、続いてオートクレーブと膜ろ過が行われます。サーモフィッシャーの水の生産に使用される精製装置には、ISO9001の厳格な仕様に従って、定期的なメンテナンスおよび試験手順が適用されます。
Technical bulletins
TechNotes articles
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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